Inhibition of hepatitis B virus gene expression and replication by artificial microRNA

瞄准：由 transfecting artificial microRNA (amiRNA ) 调查肝炎 B (HBV ) 复制和表示的禁止的效果进 HepG2.2.15 房间。方法：三个 amiRNA-HBV 原生质标志被构造并且 transfected 进 HepG2.2.15 房间。HBV 抗原分泌物被解决时间的 fluoroimmunoassays (TRFIA ) 与短暂、稳定的 transfection 在房间检测。HBV DNA 复制被荧光检验 HBV S mRNA 的量的 PCR，和水平被半量的 RT-PCR 测量。结果：进 2.2.15 个房间的向量的短暂 transfection 的效率是 55%-60% 。所有向量在 transfection 以后在 72 h 和 96 h 在 HBsAg 和 HBeAg 上有重要抑制效果(P < 0.01 为所有) 。进上层清液的 HBsAg 和 HBeAg 的分泌物被 49.8%+/- 禁止分别地， 6.7% 在在 amiRNA-HBV-S608 原生质标志 transfection 的 72 h 组织的 4.7% 和 39.9%+/- 。在文化上层清液以内的 HBV DNA 的拷贝显著地也在 transfection 以后在 72 h 和 96 h 被减少(P < 0.01 为所有) 。在有稳定的 transfection 的房间，进上层清液的 HBsAg 和 HBeAg 的分泌物显著地在所有三个 transfection 组(0.01 为所有，对 negative 控制的 P < ) 被禁止。HBV DNA 的拷贝被 33.4%+/- 禁止 3.0% ， 60.8%+/-2.3% 和 70.1%+/-3.3% 分别地。结论：在 HepG2.2.15 房间， HBV 复制和表示能被指向编码区域的 HBV S 的人工的 microRNA 禁止。基于向量的人工的 microRNA 能是为长期的 HBV 感染的一条有希望的治疗学的途径。