2006•Chin J Obstet GynecolRequires access
Effects of small interfering RNA specific for Her-2 gene on biological behavior of ovarian carcinoma cell
周颖, 凌 斌, 冯定庆, 程志祥, 沈国栋, 高婷, 石永云, 王梅梅, 赵卫东, 祝怀平
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Abstract
目的 通过小分子干扰RNA(siRNA)对Her-2基因表达的影响,探讨其对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞生物学行为的影响.方法 针对Her-2基因的siRNA质粒和阴性对照质粒在脂质体介导下转染到包装病毒细胞株PT67中,嘌呤霉素筛选细胞克隆,收集其上清液并感染SKOV3细胞,经过嘌呤霉素筛选得到稳定转染的细胞株SKOV3/siRNA、SKOV3/siRNA-negative,并通过RT-PCR和免疫组化方法鉴定Her-2基因表达的抑制效果.用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖并绘制生长曲线,通过流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡,并将稳定转染的细胞株接种到裸鼠皮下检测成瘤情况.结果 (1)SKOV3/siRNA细胞Her-2基因的表达明显减弱.(2)SKOV3/siRNA细胞的G0/G1期细胞占68.6%,S期细胞占15.1%,SKOV3/siRNA-negative细胞的G0/G1期占55.8%,S期占23.3%.(3)SKOV3/siRNA细胞的早期凋亡率为(10.500±0.250)%,而SKOV3/siRNA-negative细胞为(0.340±0.010)%,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(4)与SKOV3/siRNA-negative细胞比较,SKOV3/siRNA细胞的生长速度减慢(P＜0.05),接种于裸鼠皮下的肿瘤生长速度明显减慢(P＜0.01).结论 siRNA可以有效抑制Her-2基因的表达,抑制卵巢癌细胞的生物学行为。