Replication of clinical hepatitis B virus isolate and its application for selecting antiviral agents for chronic hepatitis B patients

瞄准：为了建立怀有 replicative 的一个房间模型，临床的肝炎 B (HBV ) 孤立并且为长期的肝炎 B (CHB ) 病人在 anti-HBV 代理人的个性化的选择评估它的申请。方法：从 8 个 CHB 病人的全身的 HBV genomic DNA 被聚合酶链反应(PCR ) 放大。所有病人与 lamivudine 被对待至少七个月并且最后对 lamivudine 变得抵抗。放大 HBV DNA 碎片被树液插入到 pHY106 向量我消化。包含 HBV 染色体的 1.1 个拷贝的 recombinant 原生质标志是分别地，短暂地，进 Huh7 房间线的 transfected，和 HBsAg， HBeAg 和细胞间的 HBV replicative 中介的层次被 ELISA 和南部的污点分析决定与或没有 lamivudine 和 adefovir 治疗。有 adefovir 的抗病毒的治疗予病人被以并且在平行分析了。结果：HBV 孤立的 25 独立人士全部的 A 从重量的单位被获得一 of 8 个病人，每个病人有至少二孤立。从每个个人的一 isolate 被选择，潜水艇克隆向量进 pHY106，包括 5 与 YVDD 孤立变化， 3 与 YIDD 孤立变化。怀有 HBV 孤立的所有 recombinant 原生质标志是进 Huh7 房间的 transfected。结果显示在临床的 HBV 的 HBV replicons 带的那个 HBV 染色体孤立能有效地在 Huh7 复制并且表示房间。Adefovir，然而并非 lamivudine，禁止的 HBV 复制在试管内和在活体内，和在试管内抑制是剂量依赖者。结论：此处描述的新奇方法在诊所启用 anti-HBV 代理人的个性化的选择并且在为 CHB 的抗病毒的治疗的未来研究是有用的。