The contribution of nuclear factor kappa-B in the modulation of TNF-α on the expression of MMP-3 and MMP-9 in cultured human trabecular cells

目的 探讨核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是否参与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)调节人眼小粱细胞(human trabecular cells,HTCs)表达基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3,MMP-3)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的过程.方法 采用RT-PCR法和酶谱分析法(zymography)检测体外培养的人眼小梁细胞经0 ng/ml(对照组)、1 ng/ml、10 ng/ml、25 ng/ml TINF-α处理24 h后,细胞表达MMP-3、MMP-9的量;运用NF-κB的特异抑制剂二硫氨基甲酸吡啶(pyrrolidine dithocarba-mate,PDTC)抑制NF-κB的活化,观察TNF-α对体外培养的HTCs MMP-3,MMP-9表达影响的改变.结果 运用RT-PCR法和酶谱分析法研究均发现经浓度为1ng/ml、10 ng/ml、25 ng/ml的TNF-α处理的细胞在mRNA和上清液中活性蛋白水平均能增加MMP-3、MMP-9的表达,各组mRNA/β-actin吸光度比值和条带酶解量与对照组相比差异均有显著性(P＜0.05).提前30 min加入PDTC,MMP-3、MMP-9的表达量分别较未加入PDTC组表达量明显减少,差异有显著性(P＜0.05).结论 TNF-α可上调MMP-3及MMP-9的表达,PDTC能够下调TNF-α对小梁细胞MMP-3及MMP-9的表达,因此推测NF-κB可能参与MMP3和MMP-9转录的启动。