2019Annual Report of The Kansai Plant Protection SocietyOpen access

Diagnosis of shiso mosaic disease using a reverse transcription loop-mediated isothermal amplification assay

Ryoji Suzuki, Hidenori Horikawa, Kenta Tsunekawa, Kenji Kubota

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Abstract

シソモザイク病の病原ウイルスであるPMoVをRT-LAMP法により検出する技術を開発した。PMoVは日本国内に広く分布しており,塩基配列に基づいて主に2つのクレードを構成することが知られているが,各クレードに対応する2種類のFIPおよびBIPプライマーを混合することによって,供試した全てのPMoVを検出できた。また,注射針で罹病葉を突いて得た簡易な鋳型でも,92.3%の精度でPMoVを検出できた。さらに,電源が確保できない場所でも,自動車のバッテリーを利用してRT-LAMP反応を行うことでオンサイトでPMoVを検出できた。

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シソモザイク病の病原ウイルスであるPMoVをRT-LAMP法により検出する技術を開発した。PMoVは日本国内に広く分布しており,塩基配列に基づいて主に2つのクレードを構成することが知られているが,各クレードに対応する2種類のFIPおよびBIPプライマーを混合することによって,供試した全てのPMoVを検出できた。また,注射針で罹病葉を突いて得た簡易な鋳型でも,92.3%の精度でPMoVを検出できた。さらに,電源が確保できない場所でも,自動車のバッテリーを利用してRT-LAMP反応を行うことでオンサイトでPMoVを検出できた。

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Method / approach

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Limitations

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Applications

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Available abstract

シソモザイク病の病原ウイルスであるPMoVをRT-LAMP法により検出する技術を開発した。PMoVは日本国内に広く分布しており,塩基配列に基づいて主に2つのクレードを構成することが知られているが,各クレードに対応する2種類のFIPおよびBIPプライマーを混合することによって,供試した全てのPMoVを検出できた。また,注射針で罹病葉を突いて得た簡易な鋳型でも,92.3%の精度でPMoVを検出できた。さらに,電源が確保できない場所でも,自動車のバッテリーを利用してRT-LAMP反応を行うことでオンサイトでPMoVを検出できた。

Key concepts: Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification, Loop-mediated isothermal amplification, Molecular biology, Reverse transcriptase, Virology, Mosaic, Transcription (linguistics), Loop (graph theory)

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