Effect of Human Oviduct Epithelial Cells and Vero Cell on Early Mouse Embryonal Development In Vitro

목적 : 본 연구는 사람의 난관세포와 Vero 세포를 각각 생쥐의 배아와 공배양함으로써 사람의 난관세포와 Vero 세포의 공배양이 배아발생에 미치는 영향에 대해 비교해 보고자 한다. 연구 방법 : 자궁절제술을 받은 가임기 여성의 난관에서 채취된 난관상피세포와 Vero 세포를 배양하여 준비한 후, 생쥐에서 얻은 배아를 FBS (Fetal Bovine Serum)을 첨가한 Ham`s F-10 배양액에서 공배양하여 배아의 발달 단계별로 관찰하고 Ham`s F-10에 10% FBS가 첨가된 배양액에서 세포없이 배아 단독으로 배양한 군을 대조군으로 하여 비교 분석하였다. 결과 : 1. 난관상피세포 및 Vero 세포와 공배양한 군에서 배아 발생율은 각각 81%와 79.5%로 나타났으며, 대조군의 65.5%에 비하여 유의하게 높게 나타났다 (p<0.05). 난관상피세포 및 Vero 세포와 공배양한 군에서 배아의 부화율 (hatching rate)도 각각 63.5%와 60.5%로 대조군의 34.5%에 비해 유의하게 높게 나타났다 (p<0.05). 2. 계대 배양된 난관상피세포와 생쥐배아를 공배양하였을 때 계대 배양된 상피세포와의 공배양시 발생율과 부화율은 각각의 계대간 상피세포와의 공배양이 배아의 발생에는 유의하게 작용하지 않았다. 또한 계대 배양된 Vero 세포와의 공배양시 발생율과 부화율은 각각 83.3%와 63.3%로 계대 배양된 상피세포와의 계대 배양된 Vero 세포와의 비교에서도 통계학적으로 유의하지 않았다. 3. 동결-해빙한 공배양 세포와 공배양시 배아의 발생율을 살펴보면 난관상피세포와 공배양할 경우 계대 배양시 발생율과 부화율은 동결-해빙후 계대 배양한 공배양군에서의 발생율 및 부화율과 유의한 차이는 나타나지 않았다. 또한 동결-해빙후 배양된 Vero 세포와의 공배양에서는 발생율과 부화율은 각각 81.3%와 67.3%로 동결-해빙후 계대된 상피세포와의 비교에서도 통계학적으로 유의하지 않았다. 4. 계대 배양된 난관상피세포와 동결-해빙된 난관상피세포에서 공배양시 각각의 발생율과 부화율은 유의한 차이는 나타나지 않았다. 또한 계대 배양한 Vero 세포와 동결-해빙된 Vero 세포에서 공배양시 각각에서 발생율과 부화율은 유의한 차이가 나타나지 않았다. 결론 : 체외수정 시술에서 사람의 난관세포 및 Vero 세포와의 공배양은 생쥐배아의 발달 및 부화에 증진 효과가 있음을 확인할 수 있다. 또한 난관상피세포 및 Vero 세포와의 공배양이 생쥐배아의 발생율과 부화율에는 유의한 차이가 없음을 관찰할 수 있으며 공배양세포를 동결-해빙하여도 그 기능에는 큰 차이가 없음을 관찰 할 수 있다. 따라서 체외수정 프로그램시 난관상피세포나 Vero 세포를 사용하여 공배양하면 임신성공율 향상에 좋은 결과를 가져올 것으로 생각된다.