2008•Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunyatseniRequires access

Mechanism of Induction of Apoptosis by siRNA Targeting hTERT in HeLa Cells

王建, 任常山

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Abstract

由指向人的 telomerase 的 siRNA 调查 apoptosis 的正式就职的分子的机制的目的在 HeLa 房间颠倒 transcriptase (hTERT ) 。方法 HeLa 房间是有由脂肪的一些方法的 siRNAs 的 transfected。RT-PCR 被用来在 HeLa 房间检验 hTERT 的 mRNA 层次。Microarray 试金被采用探索 apoptosis 介绍联系基因的 transcriptional。hTERT,小道, Bcl-2,和细胞质 Cyt c 的蛋白质层次被西方的弄污检测。apoptosis 率被流动血细胞计数用染色的 PI 决定。Caspase-3 和 Caspase-8 的放射性比度被比色测定测量。结果指向 hTERT 的 siRNA 显著地压制了 hTERT 基因的表示。在 transfection 以后的 48 个小时,小道的表示水平被增加, Bcl-2 的表示水平被减少,释放 Cyt c 被提高, Caspase-3 的激活被增加, apoptosis 率被增加。结论 hTERT-siRNA 经由激活 mitochondrial 信号转导变异小径导致 HeLa 房间的 apoptosis。

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由指向人的 telomerase 的 siRNA 调查 apoptosis 的正式就职的分子的机制的目的在 HeLa 房间颠倒 transcriptase (hTERT ) 。方法 HeLa 房间是有由脂肪的一些方法的 siRNAs 的 transfected。RT-PCR 被用来在 HeLa 房间检验 hTERT 的 mRNA 层次。Microarray 试金被采用探索 apoptosis 介绍联系基因的 transcriptional。hTERT,小道, Bcl-2,和细胞质 Cyt c 的蛋白质层次被西方的弄污检测。apoptosis 率被流动血细胞计数用染色的 PI 决定。Caspase-3 和 Caspase-8 的放射性比度被比色测定测量。结果指向 hTERT 的 siRNA 显著地压制了 hTERT 基因的表示。在 transfection 以后的 48 个小时,小道的表示水平被增加, Bcl-2 的表示水平被减少,释放 Cyt c 被提高, Caspase-3 的激活被增加, apoptosis 率被增加。结论 hTERT-siRNA 经由激活 mitochondrial 信号转导变异小径导致 HeLa 房间的 apoptosis。

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Method / approach

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Main findings

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由指向人的 telomerase 的 siRNA 调查 apoptosis 的正式就职的分子的机制的目的在 HeLa 房间颠倒 transcriptase (hTERT ) 。方法 HeLa 房间是有由脂肪的一些方法的 siRNAs 的 transfected。RT-PCR 被用来在 HeLa 房间检验 hTERT 的 mRNA 层次。Microarray 试金被采用探索 apoptosis 介绍联系基因的 transcriptional。hTERT,小道, Bcl-2,和细胞质 Cyt c 的蛋白质层次被西方的弄污检测。apoptosis 率被流动血细胞计数用染色的 PI 决定。Caspase-3 和 Caspase-8 的放射性比度被比色测定测量。结果指向 hTERT 的 siRNA 显著地压制了 hTERT 基因的表示。在 transfection 以后的 48 个小时,小道的表示水平被增加, Bcl-2 的表示水平被减少,释放 Cyt c 被提高, Caspase-3 的激活被增加, apoptosis 率被增加。结论 hTERT-siRNA 经由激活 mitochondrial 信号转导变异小径导致 HeLa 房间的 apoptosis。

Key concepts: HeLa, Telomerase reverse transcriptase, Apoptosis, Transfection, Telomerase, Molecular biology, Chemistry, Small interfering RNA

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