Effect of cycloheximide upon maturation of bovine oocytes

― Germinal vesicle breakdown (GVBD) of bovine oocytes was completely blocked by cy- cloheximide added to culture medium at concentrations of 1―20 pglml.Nevertheless, under such conditions a certain degree of chromatin condensation inside the germinal vesicle was observed.The inhibitory effect was not influenced by the presence or absence of cumulus cells and was fully reversible; but the process of GVBD was then significantly accelerated.The critical period in which the proteins necessary for GVBD are synthesized lasts approximately the first 5 h of culture.When germinal vesicle-arrested oocytes are fused to maturing bovine oocytes containing condensed chro- mosomes, GVBD of immature oocytes occurs within 3 h, even in the presence of cycloheximide.In the mouse, GVBD cannot be inhibited by protein synthesis inhibitors.When immature mouse oo- cytes are fused with immature bovine oocytes and the giant cells are then cultured in cycloheximidesupplemented medium, both GVs are observed, or only mouse GVBD occurs in common cytoplasm after 8 h of culture.We conclude that protein synthesis is necessary for GVBD of bovine oocytes.Our results also suggest that maturation-promoting factor (MPF) is not autocatalytically amplified in mammalian oocytes.oocytematurationcycloheximide -bovine Résumé -Effet de la cycloheximide sur la maturation des ovocytes bovins.La rupture de la vesicule germinative (RVG) d'ovocytes bovins est complètement inhibée par la cycloheximide ajou- tée au milieu de culture, à la concentration de 1 à 20 flglml.Cependant dans ces conditions un cer- tain degré de condensation de la chromatine est observé dans la vésicule germinative.L'effet inhibi- teur, non modifié par la présence ou l'absence de cellules du cumulus, est complètement réversible; en cas de réversion, la processus de RVG est significativement accéléré.La période critique pendant laquelle les protéines nécessaires pour la RVG sont synthétisées dure environ les 5 premières h de culture.Lorsque des ovocytes bloqués au stade de la vésicule germinative sont fusionnés à des ovocytes bovins en cours de maturation contenant des chromosomes condensés, la RVG des ovocytes immatures se produit dans les 3 h, même en présence de cycloheximide.Chez la souris, la RVG ne peut être empêchée par des inhibiteurs de synthèse protéique.Quand des ovocytes mu- rins immatures sont fusionnés avec des ovocytes bovins immatures et que les cellules géantes sont cultivées dans un milieu contenant de la cycloheximide, les 2 vésicules germinatives persistent dans le cytoplasme commun ou seulement celle d'origine bovine, après 8 h de culture.La synthèse de protéines apparaît donc nécessaire pour la RVG des ovocytes bovins.Nos résultats suggèrent aussi que le facteur promouvant la maturation (MFP) n'est pas amplifié de manière autocatalytique dans les ovocytes de Mammifères.ovocytematurationcycloheximide -bovin