2006Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunyatseniRequires access

Construction of an oral recombinant DNA vaccine from Hpylori neutrophil activating protein and its immunogenicity

Bo Bo, Sun, Zhao-Shen, Li, Zhenxing, Tu, Guo-ming, Xu, Yi-Qi, Du

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Abstract

瞄准:构造实时稀释沙门氏菌 typhimurium (S。typhimurium ) 怀有 H pylori 的紧张嗜中性的激活蛋白质(HP 小睡) 基因作为一支口头的 recombinant DNA 疫苗,并且到评估它的 immunogenicity。方法:由遗传工程方法, H pylori 的 genomic DNA 作为一个模板被提取。HP 小睡基因的全部的长度被聚合酶链反应(PCR ) 放大并且为定序和强风分析克隆向量进 pBT,然后,克隆进真核细胞的表示向量 pIRES 的潜水艇由 PCR 鉴定和限制酶消化列在后面。识别 recombinant 原生质标志 pIRES 小睡是进为目标熔化蛋白质表示的 COS-7 房间的 transfected,并且它的抗原性被西方的弄污检测。然后, recombinant 原生质标志被转变成实时稀释 S。typhimurium 拉紧一支口头的疫苗拉紧的 SL7207,并且它的 immunogenicity 与动物实验被评估。结果:435 bp 产品在 GenBank (超过 98%) 与 HP 小睡基因用高相同被克隆。与由 PCR 和限制酶消化的鉴定, recombinant 包含 H pylori 的 HP 小睡基因的真核细胞的表示原生质标志 pIRES 小睡成功地被构造。表示目标蛋白质与 H pylorii 全部房间抗体有特异性反应并且显示出西方的弄污检测的单个长带结果。有 recombinant DNA 疫苗的紧张 SL7207 (pIRES 小睡) 的老鼠的口头的免疫也导致了特定的有免疫力的回答。结论:与好 immunogenicity 疫苗的 HP 小睡口头的 DNA 的成功的构造可以帮助进一步对 H pylori 感染调查它的免疫保护效果和 develop 疫苗。

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瞄准:构造实时稀释沙门氏菌 typhimurium (S。typhimurium ) 怀有 H pylori 的紧张嗜中性的激活蛋白质(HP 小睡) 基因作为一支口头的 recombinant DNA 疫苗,并且到评估它的 immunogenicity。方法:由遗传工程方法, H pylori 的 genomic DNA 作为一个模板被提取。HP 小睡基因的全部的长度被聚合酶链反应(PCR ) 放大并且为定序和强风分析克隆向量进 pBT,然后,克隆进真核细胞的表示向量 pIRES 的潜水艇由 PCR 鉴定和限制酶消化列在后面。识别 recombinant 原生质标志 pIRES 小睡是进为目标熔化蛋白质表示的 COS-7 房间的 transfected,并且它的抗原性被西方的弄污检测。然后, recombinant 原生质标志被转变成实时稀释 S。typhimurium 拉紧一支口头的疫苗拉紧的 SL7207,并且它的 immunogenicity 与动物实验被评估。结果:435 bp 产品在 GenBank (超过 98%) 与 HP 小睡基因用高相同被克隆。与由 PCR 和限制酶消化的鉴定, recombinant 包含 H pylori 的 HP 小睡基因的真核细胞的表示原生质标志 pIRES 小睡成功地被构造。表示目标蛋白质与 H pylorii 全部房间抗体有特异性反应并且显示出西方的弄污检测的单个长带结果。有 recombinant DNA 疫苗的紧张 SL7207 (pIRES 小睡) 的老鼠的口头的免疫也导致了特定的有免疫力的回答。结论:与好 immunogenicity 疫苗的 HP 小睡口头的 DNA 的成功的构造可以帮助进一步对 H pylori 感染调查它的免疫保护效果和 develop 疫苗。

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Method / approach

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Limitations

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Applications

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瞄准:构造实时稀释沙门氏菌 typhimurium (S。typhimurium ) 怀有 H pylori 的紧张嗜中性的激活蛋白质(HP 小睡) 基因作为一支口头的 recombinant DNA 疫苗,并且到评估它的 immunogenicity。方法:由遗传工程方法, H pylori 的 genomic DNA 作为一个模板被提取。HP 小睡基因的全部的长度被聚合酶链反应(PCR ) 放大并且为定序和强风分析克隆向量进 pBT,然后,克隆进真核细胞的表示向量 pIRES 的潜水艇由 PCR 鉴定和限制酶消化列在后面。识别 recombinant 原生质标志 pIRES 小睡是进为目标熔化蛋白质表示的 COS-7 房间的 transfected,并且它的抗原性被西方的弄污检测。然后, recombinant 原生质标志被转变成实时稀释 S。typhimurium 拉紧一支口头的疫苗拉紧的 SL7207,并且它的 immunogenicity 与动物实验被评估。结果:435 bp 产品在 GenBank (超过 98%) 与 HP 小睡基因用高相同被克隆。与由 PCR 和限制酶消化的鉴定, recombinant 包含 H pylori 的 HP 小睡基因的真核细胞的表示原生质标志 pIRES 小睡成功地被构造。表示目标蛋白质与 H pylorii 全部房间抗体有特异性反应并且显示出西方的弄污检测的单个长带结果。有 recombinant DNA 疫苗的紧张 SL7207 (pIRES 小睡) 的老鼠的口头的免疫也导致了特定的有免疫力的回答。结论:与好 immunogenicity 疫苗的 HP 小睡口头的 DNA 的成功的构造可以帮助进一步对 H pylori 感染调查它的免疫保护效果和 develop 疫苗。

Key concepts: Immunogenicity, Recombinant DNA, DNA vaccination, Virology, Biology, DNA, Molecular biology, Microbiology

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