2010•生物化学与生物物理学报：英文版Requires access
A convenient spectrometric assay system for intracellular quantitative measurement of DNA glycosylase activity
Shiying, Li, Qilai, Huang, LU LU, Wang, Yan, Lan Lan, Xin, Zhang, Bing-Ya, Yang Yang, Pan, Du, Zichun, Hua
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Abstract
Cytosine methylation 是一个重要生物学事件。然而，它也由于由自发的水解作用的 5-methylcytosine 的 deamination 是 genomic 不稳定性的来源，它生产胸腺嘧啶并且导致 G : T 失配。胸腺嘧啶 DNA glycosylase 和 methyl-CpG-binding 蛋白质 4 是涉及失配修理进步的主要 DNA glycosylases，并且他们的活动在许多相关研究被测量了。在这研究，我们为细胞内部的 DNA glycosylase 活动的特定、量的测量开发了一个方便度谱的试金系统。G : T 失配被介绍进萤火虫的在上游的区域在 pGL3 控制 plasmid 的编码酶的顺序。仅当 G : T 失配被修理到 G : C，酶将在 transfected 房间被表示。由测量酶活动，它简单、方便，细胞内部的 DNA glycosylase 活动能是坚定的。