2007•生物化学与生物物理学报:英文版Requires access

Bcl-XL Small Interfering RNA Sensitizes Cisplatin-resistant Human Lung Adenocarcinoma Cells

Xiaoyong, Lei Lei, Zexiang, Huang, Miao, Zhong, Bing-Yang, Zhu, Shengsong, Tang, Duan-fang, Liao

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Abstract

Bcl-XL 完了在许多人的肿瘤表示了并且被包含 intumorigenesis 和 chemoresistance。这研究调查了 hairpinBcl-XL 的禁止的效果在 cisplatin (DDP ) 的 Bcl-XL 基因的表示上的小介入 RNA (siRNA ) 在 A549/DDP 房间的药促进感受性上的 Bcl-XL siRNA 的抵抗的人的肺腺癌房间线 A549/DDP,和效果。Bcl-XL siRNA 和否定 siRNA 原生质标志被构造并且稳定地 transfected 进 A549/DDP 房间。反向的抄写聚合酶链反应和 Westernblot 分析被用来检测目标基因表达。房间的自发的 apoptosis 被染色的氮蒽橘子和 ethidium 溴化物检测。到 DDP 的房间的药敏感与 dimethylthiazol-diphenyltetrazolium 溴化物(MTT ) 和流动 cytometry 被分析。在 siRNA 马厩 transfectants 的 Bcl-XL mRNA 和蛋白质的 Expressionlevels 清楚地作为与否定 siRNA transfectants 和未经治疗的房间相比被减少。MTT 结果显示 Bcl-XLtransfectants 让更高的房间抑制与 0.2-200 mug/ml DDP 比否定向量或未经治疗的房间再处理评价。流动 cytometry 在 Bcl-XL siRNAcells 揭示了增加的 apoptosis。在 20 mug/ml DDP 的增加以后,在 A549/DDP 房间,增加的自发的 apoptosis,和敏化的房间 Bcl-XL 基因指向调整 specificallydown 的基因表达到 DDP 的 siRNA。结果证明 Bcl-XL siRNA 在 non-small-cell 肺癌症贡献了导致 DDP 的房间死亡的增加并且敏化房间到 DDP,导致在治疗 non-small-cell 肺癌症增加了这药的有效性。

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Bcl-XL 完了在许多人的肿瘤表示了并且被包含 intumorigenesis 和 chemoresistance。这研究调查了 hairpinBcl-XL 的禁止的效果在 cisplatin (DDP ) 的 Bcl-XL 基因的表示上的小介入 RNA (siRNA ) 在 A549/DDP 房间的药促进感受性上的 Bcl-XL siRNA 的抵抗的人的肺腺癌房间线 A549/DDP,和效果。Bcl-XL siRNA 和否定 siRNA 原生质标志被构造并且稳定地 transfected 进 A549/DDP 房间。反向的抄写聚合酶链反应和 Westernblot 分析被用来检测目标基因表达。房间的自发的 apoptosis 被染色的氮蒽橘子和 ethidium 溴化物检测。到 DDP 的房间的药敏感与 dimethylthiazol-diphenyltetrazolium 溴化物(MTT ) 和流动 cytometry 被分析。在 siRNA 马厩 transfectants 的 Bcl-XL mRNA 和蛋白质的 Expressionlevels 清楚地作为与否定 siRNA transfectants 和未经治疗的房间相比被减少。MTT 结果显示 Bcl-XLtransfectants 让更高的房间抑制与 0.2-200 mug/ml DDP 比否定向量或未经治疗的房间再处理评价。流动 cytometry 在 Bcl-XL siRNAcells 揭示了增加的 apoptosis。在 20 mug/ml DDP 的增加以后,在 A549/DDP 房间,增加的自发的 apoptosis,和敏化的房间 Bcl-XL 基因指向调整 specificallydown 的基因表达到 DDP 的 siRNA。结果证明 Bcl-XL siRNA 在 non-small-cell 肺癌症贡献了导致 DDP 的房间死亡的增加并且敏化房间到 DDP,导致在治疗 non-small-cell 肺癌症增加了这药的有效性。

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Key contribution

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Method / approach

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Main findings

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Limitations

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Applications

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Available abstract

Bcl-XL 完了在许多人的肿瘤表示了并且被包含 intumorigenesis 和 chemoresistance。这研究调查了 hairpinBcl-XL 的禁止的效果在 cisplatin (DDP ) 的 Bcl-XL 基因的表示上的小介入 RNA (siRNA ) 在 A549/DDP 房间的药促进感受性上的 Bcl-XL siRNA 的抵抗的人的肺腺癌房间线 A549/DDP,和效果。Bcl-XL siRNA 和否定 siRNA 原生质标志被构造并且稳定地 transfected 进 A549/DDP 房间。反向的抄写聚合酶链反应和 Westernblot 分析被用来检测目标基因表达。房间的自发的 apoptosis 被染色的氮蒽橘子和 ethidium 溴化物检测。到 DDP 的房间的药敏感与 dimethylthiazol-diphenyltetrazolium 溴化物(MTT ) 和流动 cytometry 被分析。在 siRNA 马厩 transfectants 的 Bcl-XL mRNA 和蛋白质的 Expressionlevels 清楚地作为与否定 siRNA transfectants 和未经治疗的房间相比被减少。MTT 结果显示 Bcl-XLtransfectants 让更高的房间抑制与 0.2-200 mug/ml DDP 比否定向量或未经治疗的房间再处理评价。流动 cytometry 在 Bcl-XL siRNAcells 揭示了增加的 apoptosis。在 20 mug/ml DDP 的增加以后,在 A549/DDP 房间,增加的自发的 apoptosis,和敏化的房间 Bcl-XL 基因指向调整 specificallydown 的基因表达到 DDP 的 siRNA。结果证明 Bcl-XL siRNA 在 non-small-cell 肺癌症贡献了导致 DDP 的房间死亡的增加并且敏化房间到 DDP,导致在治疗 non-small-cell 肺癌症增加了这药的有效性。

Key concepts: Small interfering RNA, Cisplatin, Bcl-xL, Apoptosis, Transfection, MTT assay, A549 cell, Molecular biology

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