High-throughput screening for monoamine oxidase-A and monoamine oxidase-B inhibitors using one-step fluorescence assay

瞄准：开发高产量的屏蔽(HTS ) 为单音的胺氧化酶(毛) 的试金 A 和 MAO-B 禁止者。方法：一根荧光探针基于测量毛的方法 -- A 和 MAO-B 活动被建立并且优化与它的敏感，稳定性和特性评估了。包括在 384 井格式的酶来源，底层集中，孵化体积和反应时间的反应条件被优化达到敏感、低的肺结核病人目标。结果：处于优化条件，毛的动态参数 -- A 和 MAO-B 被获得。到毛的血清素的 K (m) 价值 -- A 是 1.66 micromol/L，当到 MAO-B 的本甲基胺的是 0.80 micromol/L 时。到毛的 clorgyline 的 IC (50 ) 价值 -- A 是 2.99 nmol/L，并且到 MAO-B 的 deprenyl 的是 7.04 nmol/L，匹配从传统的度谱的试金获得的那些。在测试样品之中，一混合物在毛上施加了禁止的效果 -- 有 IC (50 ) 的一项活动作为 0.13， 0.19，和 0.13 micromol/L 与 IC (50 ) 在 MAO-B 活动作为 0.36 micromol/L，和三混合物有禁止的效果。Z' 因素分别地在 MAO-A-inhibitor 和 MAO-B-inhibitor HTS 系统是 0.71+/-0.03 和 0.75+/-0.03。结论：确定的试金能很好被用于毛 -- 与高质量，精确和重制度屏蔽的 A 和 MAO-B 禁止者。