2006•中国药理学报：英文版Requires access
A20 overexpression under control of mouse osteocalcin promoter in MC3T3-E1 cells inhibited tumor necrosis factor-alpha-induced apoptosis
Yuejuan, Qin Qin, Zhen-lin, Chang Zhang, Luyang, Fujun Yu, Jinwei, He, Yanan, Hou, Tianjin, Liu, Jia-cai, Wu, Song-Hua, Lihe, Guo
Open publisher page 0 citations
Abstract
瞄准：在鼠标 osteocalcin 倡导者(OC-A20 ) 的控制下面构造 A20 表达式向量，并且调查成骨细胞 MC3T3-E1 房间线，稳定地，在快车 A20 上，蛋白质它阻止了肿瘤坏死因素(TNF )-alpha-induced apoptosis。方法：OC-A20 向量被与人的 A20 互补 DNA 熔化老鼠 osteocalcin gene-2 倡导者的碎片构造。然后，老鼠 MC3T3-E1 房间排队，稳定地由 A20 的 transfected，被建立。在房间的 A20 mRNA 和 A20 蛋白质的表示被反向的抄写聚合酶链反应(RT-PCR ) 和西方的污点分析分别地检测。在胚胎成纤维细胞 NIH3T3 房间衬里的造骨细胞，老鼠成骨细胞 MC3T3-E1 房间线和老鼠决定 A20 表示的特性是短暂地有 OC-A20 的 transfected。在 MC3T3-E1 房间的 A20 的 anti-apoptotic 角色被流动 cytometric 分析(FACS ) 决定，终端 dUTP 刻痕标记 endo (TUNEL ) 和 DNA 胶化电气泳动分析(DNA 梯子) 分别地。结果：弱 A20 表示与鼠标 A20 的教材在 MC3T3-E1 房间被发现。A20 mRNA 和 A20 蛋白质表示用 RT-PCR 和西方的污点分析与 OC-A20 在 MC3T3-E1 房间 transfected 被识别。在 MC3T3-E1 房间和 NIH3T3 房间是有 OC-A20 的短暂 transfected 以后，仅仅 A20 mRNA 表示在 MC3T3-E1 房间被发现。减少显然与空向量(pcDNA3 ) 相比在 OC-A20 组处于 apoptosis 的率发生了由 FACS (P< 0.001 ) 的组。积极染色与 OC-A20 组(P< 0.001 ) 相比在 pcDNA 组被发现的 TUNEL 的重要增加。同时，类似的效果在 DNA 胶化电气泳动分析被表明。结论：我们构造了在 MC3T3-E1 房间表示了 A20 蛋白质并且证实 A20 保护造骨细胞免于 TNF-alpha-induced apoptosis 的造骨细胞特定的表示向量。