Stable EGFP Gene Expression in C6 Glioma Cell Line after Transduction with HIV-1-based Lentiviral Vector
金贵善, 刘福生, 柴奇, 王建交, 历俊华
Abstract
金贵善, 刘福生, 柴奇, 王建交, 历俊华
Abstract
建立一个稳定的 C6/EGFP 神经胶质瘤房间的目的在神经胶质瘤上为研究排队。C6 神经胶质瘤房间线是有人的免疫不全病毒的 transfected 的方法打字(HIV-1 ) 我基于包含二提高倡导者 CMV 和 EF1α 的 lentivirus 向量。提高的绿荧光灯的蛋白质(EGFP ) 积极 C6 房间被激活荧光的房间种类整理。EGFP 的表示被荧光灯的显微镜学观察。在 C6 染色体的 EGFP 基因被聚合酶链反应(PCR ) 和定序的 DNA 估计。原版和 transfected 房间生物学上并且 cytomorphologically 被比较。结果 Lentivirus 向量 transfection 生产了多达 40%EGFP 积极的房间。在激活荧光的房间种类选择以后,纯房间线 C6/EGFP 被建立。定序的 PCR 和 DNA 在 C6 房间染色体揭示了 EGFP 基因的集成。房间特征的分析没揭示 transfected 和原来的房间之间的差别。一个 C6/EGFP 房间衬里表示 EGFP 为一个标记的结论被建立,在哪个 EGFP 基因集成于染色体。当为进一步基本的研究和基因治疗的一个有希望的工具学习,这根房间线能被服务。
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建立一个稳定的 C6/EGFP 神经胶质瘤房间的目的在神经胶质瘤上为研究排队。C6 神经胶质瘤房间线是有人的免疫不全病毒的 transfected 的方法打字(HIV-1 ) 我基于包含二提高倡导者 CMV 和 EF1α 的 lentivirus 向量。提高的绿荧光灯的蛋白质(EGFP ) 积极 C6 房间被激活荧光的房间种类整理。EGFP 的表示被荧光灯的显微镜学观察。在 C6 染色体的 EGFP 基因被聚合酶链反应(PCR ) 和定序的 DNA 估计。原版和 transfected 房间生物学上并且 cytomorphologically 被比较。结果 Lentivirus 向量 transfection 生产了多达 40%EGFP 积极的房间。在激活荧光的房间种类选择以后,纯房间线 C6/EGFP 被建立。定序的 PCR 和 DNA 在 C6 房间染色体揭示了 EGFP 基因的集成。房间特征的分析没揭示 transfected 和原来的房间之间的差别。一个 C6/EGFP 房间衬里表示 EGFP 为一个标记的结论被建立,在哪个 EGFP 基因集成于染色体。当为进一步基本的研究和基因治疗的一个有希望的工具学习,这根房间线能被服务。
Key concepts: Green fluorescent protein, Transfection, Lentivirus, Transduction (biophysics), Molecular biology, Cell culture, Biology, Viral vector