2007•生物化学与生物物理学报:英文版Requires access

Expression and Characterization of Recombinant Thermostable Alkaline Phosphatase from a Novel Thermophilic Bacterium Thermus thermophilus XM

Jianbo, Li, Li-Mei ....................................................................., Xü, Feng, Yang

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Abstract

从 thermophilic 细菌 Thermus thermophilus XM 编码热水瓶桌子碱性磷酸酶的基因(龙头) 被克隆并且定序。它长是 1506 bp 并且与推出的氨基酸顺序的 54.7 kDa.Comparison 的一个计算的分子的团编码 501 氨基酸残余的蛋白质,另外的碱性磷酸酶出现了在 phosphorylation 地点和金属结合部位的附近的区域是,这高度保存了。recombinant 热水瓶桌子碱性磷酸酶在 Escherichia 关口 i 被表示为标注 His6 的熔化蛋白质,它的酶的性质在纯化以后被描绘。为 recombinant 热水瓶桌子碱性磷酸酶活动的 pH 和温度 optima 是 12 和 75 °C .As 期望的 pH ,酶显示了高 thermostability ,在在 80 °C .Its 为 6 h 孵化以后保留超过50%活动催化功能面对 0.1 公里被加速Co~(2+),Fe~(2+),Mg~(2+),或Mn~(2+)但是被 2.0 公里Fe~(2+)强烈禁止。在最佳的条件下面, Michaeli 为 p-nitrophenyl-phosphate 的劈开的常数(K_m ) 是它就和另外的碱性磷酸酶一样有的 0.034 mM.Although, recombinant 热水瓶桌子碱性磷酸酶拥有一些唯一的特征,例如高最佳的 pH 和好 thermostability。

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从 thermophilic 细菌 Thermus thermophilus XM 编码热水瓶桌子碱性磷酸酶的基因(龙头) 被克隆并且定序。它长是 1506 bp 并且与推出的氨基酸顺序的 54.7 kDa.Comparison 的一个计算的分子的团编码 501 氨基酸残余的蛋白质,另外的碱性磷酸酶出现了在 phosphorylation 地点和金属结合部位的附近的区域是,这高度保存了。recombinant 热水瓶桌子碱性磷酸酶在 Escherichia 关口 i 被表示为标注 His6 的熔化蛋白质,它的酶的性质在纯化以后被描绘。为 recombinant 热水瓶桌子碱性磷酸酶活动的 pH 和温度 optima 是 12 和 75 °C .As 期望的 pH ,酶显示了高 thermostability ,在在 80 °C .Its 为 6 h 孵化以后保留超过50%活动催化功能面对 0.1 公里被加速Co~(2+),Fe~(2+),Mg~(2+),或Mn~(2+)但是被 2.0 公里Fe~(2+)强烈禁止。在最佳的条件下面, Michaeli 为 p-nitrophenyl-phosphate 的劈开的常数(K_m ) 是它就和另外的碱性磷酸酶一样有的 0.034 mM.Although, recombinant 热水瓶桌子碱性磷酸酶拥有一些唯一的特征,例如高最佳的 pH 和好 thermostability。

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从 thermophilic 细菌 Thermus thermophilus XM 编码热水瓶桌子碱性磷酸酶的基因(龙头) 被克隆并且定序。它长是 1506 bp 并且与推出的氨基酸顺序的 54.7 kDa.Comparison 的一个计算的分子的团编码 501 氨基酸残余的蛋白质,另外的碱性磷酸酶出现了在 phosphorylation 地点和金属结合部位的附近的区域是,这高度保存了。recombinant 热水瓶桌子碱性磷酸酶在 Escherichia 关口 i 被表示为标注 His6 的熔化蛋白质,它的酶的性质在纯化以后被描绘。为 recombinant 热水瓶桌子碱性磷酸酶活动的 pH 和温度 optima 是 12 和 75 °C .As 期望的 pH ,酶显示了高 thermostability ,在在 80 °C .Its 为 6 h 孵化以后保留超过50%活动催化功能面对 0.1 公里被加速Co~(2+),Fe~(2+),Mg~(2+),或Mn~(2+)但是被 2.0 公里Fe~(2+)强烈禁止。在最佳的条件下面, Michaeli 为 p-nitrophenyl-phosphate 的劈开的常数(K_m ) 是它就和另外的碱性磷酸酶一样有的 0.034 mM.Although, recombinant 热水瓶桌子碱性磷酸酶拥有一些唯一的特征,例如高最佳的 pH 和好 thermostability。

Key concepts: Thermostability, Thermus thermophilus, Thermophile, Recombinant DNA, Escherichia coli, Thermus, Chemistry, Alkaline phosphatase

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