Functional characterization of WIP transcription factors in Arabidopsis thaliana : Caractérisation de facteurs de transcription WIP chez Arabidopsis thaliana
Farhaj Izhaq
Abstract
Farhaj Izhaq
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Le determinisme du sexe est un processus qui aboutit a la separation physique des structures a l’origine des gametes mâles et femelles, soit sur des fleurs separees sur une meme plante, pour les especes monoiques, soit sur des individus separes, dans le cas des especes dioiques. Ce mecanisme favorise la fecondation croisee et augment ainsi la variabilite genetique. Il pourrait etre influence par les facteurs endogene (genetique ou hormonal) ou environnementaux. Chez le melon, le determinisme du sexe est controle par le gene A (andromonoecious) et le gene G (gynoecious). Le gene A code pour 1-aminocyclopropane-1-carboxylique acide synthase (ACS), un enzyme implique dans la voie de biosynthese d’ethylene qui inhibe le developpement des etamines dans les fleurs femelles. Le gene G code pour une proteine C2H2 a doigt de zinc appartenant a la famille WIP de facteurs de transcription qui inhibe le developpement des capelles dans les fleurs mâles. Chez Arabidopsis thaliana, Il y a six genes WIP et on en sait tres peu sur leur fonction moleculaire. TT1/AtWIP1 est implique a l’accumulation de PA dans endothelium de graines. NTT/AtWIP2 est implique dans le developpement de TRANSMITTING TRACT de carpelle. Dans cette these, nous avons essaye de mettre en evidence la fonction moleculaire de genes WIP. Dans cette etude, nous avons montre que les genes WIP des especes differents partiellement restaurent le phenotype de graines jaune de tt1-3 mutants et regulent positivement les genes tardifs de biosynthese de flavonoides chez Arabidopsis thaliana La complementation fonctionnelle de mutants tt1-3 par le gene WIP de melon et le gene WIP de la mousse montre que les genes WIP ont la meme fonction globale mais different a l’echelle spatio-temporelle. Il a ete montre que le second motif conserve, a l’extremite N-terminal, du gene TT1 etait essentiel pour qu’il soit fonctionnel. La substitution d’acides amines de ce motif (N2) par des alanines diminue l’accumulation de proanthocyanidines (PA) dans l’endothelium de la graine. TT1 perturbe egalement le developpement des petales, des etamines et des carpelles quand il est surexprime de maniere ectopique sous le controle des promoteurs d’AP3 et CRC. Il a ete exprime dans les racines secondaires sous le promoteur du gene SOLITARY ROOT (SLR/IAA14) ainsi que dans les stipules sous le promoteur du gene GLABROUS1 (GL1). TT1 inhibe le developpement des racines secondaires et la formation des trichomes sur les feuilles. Dans cette etude, nous avons constate que TT1 agit comme un inhibiteur de la formation d’organes quand il est exprime de maniere ectopique. On cherchera dans cette etude a comprendre les mecanismes mis en jeu lors de l’arret du developpement de ces organes au cours du determinisme du sexe et a evoque de nouvelles pistes pour expliquer ce processus.%%%%Sex determination in plants is a process that results the development of either male or female flower on the same or different individuals. This mechanism enhances the cross pollination and raises the genetic variability. It can be…
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Le determinisme du sexe est un processus qui aboutit a la separation physique des structures a l’origine des gametes mâles et femelles, soit sur des fleurs separees sur une meme plante, pour les especes monoiques, soit sur des individus separes, dans le cas des especes dioiques. Ce mecanisme favorise la fecondation croisee et augment ainsi la variabilite genetique. Il pourrait etre influence par les facteurs endogene (genetique ou hormonal) ou environnementaux. Chez le melon, le determinisme du sexe est controle par le gene A (andromonoecious) et le gene G (gynoecious). Le gene A code pour 1-aminocyclopropane-1-carboxylique acide synthase (ACS), un enzyme implique dans la voie de biosynthese d’ethylene qui inhibe le developpement des etamines dans les fleurs femelles. Le gene G code pour une proteine C2H2 a doigt de zinc appartenant a la famille WIP de facteurs de transcription qui inhibe le developpement des capelles dans les fleurs mâles. Chez Arabidopsis thaliana, Il y a six genes WIP et on en sait tres peu sur leur fonction moleculaire. TT1/AtWIP1 est implique a l’accumulation de PA dans endothelium de graines. NTT/AtWIP2 est implique dans le developpement de TRANSMITTING TRACT de carpelle. Dans cette these, nous avons essaye de mettre en evidence la fonction moleculaire de genes WIP. Dans cette etude, nous avons montre que les genes WIP des especes differents partiellement restaurent le phenotype de graines jaune de tt1-3 mutants et regulent positivement les genes tardifs de biosynthese de flavonoides chez Arabidopsis thaliana La complementation fonctionnelle de mutants tt1-3 par le gene WIP de melon et le gene WIP de la mousse montre que les genes WIP ont la meme fonction globale mais different a l’echelle spatio-temporelle. Il a ete montre que le second motif conserve, a l’extremite N-terminal, du gene TT1 etait essentiel pour qu’il soit fonctionnel. La substitution d’acides amines de ce motif (N2) par des alanines diminue l’accumulation de proanthocyanidines (PA) dans l’endothelium de la graine. TT1 perturbe egalement le developpement des petales, des etamines et des carpelles quand il est surexprime de maniere ectopique sous le controle des promoteurs d’AP3 et CRC. Il a ete exprime dans les racines secondaires sous le promoteur du gene SOLITARY ROOT (SLR/IAA14) ainsi que dans les stipules sous le promoteur du gene GLABROUS1 (GL1). TT1 inhibe le developpement des racines secondaires et la formation des trichomes sur les feuilles. Dans cette etude, nous avons constate que TT1 agit comme un inhibiteur de la formation d’organes quand il est exprime de maniere ectopique. On cherchera dans cette etude a comprendre les mecanismes mis en jeu lors de l’arret du developpement de ces organes au cours du determinisme du sexe et a evoque de nouvelles pistes pour expliquer ce processus.%%%%Sex determination in plants is a process that results the development of either male or female flower on the same or different individuals. This mechanism enhances the cross pollination and raises the genetic variability. It can be…
Key concepts: Biology, Molecular biology, Arabidopsis thaliana, Genetics, Gene, Mutant