Harris hematoxylin과 Eosin 염료의 pH변화에 따른 염색성 비교

배경: 조직표본제작 시 H&E(Hematoxylin and Eosin)염색은 조직의 형태학적 구조와 세포의 변화 정도를 판단할 수 있는 가장 일반적인 염색방법이다. 이 염색에 사용되는 Hematoxylin과 Eosin은 염료분자와 조직성분의 이온결합 기전에 의해 세포의 핵과 세포질에 각각 염색되며, 두 염료의 pH 변화에 따라 염색성이 달라질 수 있다. 따라서 본원에서 시행하고 있는 H&E 염색방법을 통해 pH 변화에 따른 조직표본의 염색성을 비교하고, 염료의 적정 pH와 pH 유지의 중요성을 알아보고자 한다. 방법: 본 실험은 Liver, Kidney, Lung 의 조직표본을 대상으로 실시하였다. Harris hematoxylin(영동제약, korea) 과 제조한 Eosin(Sigma Chemical, USA)을 사용하여 varistain XY(Shandon, USA)로 염색을 실시하였고 pH는 300 A digital pH meter(Bantex, USA)를 이용하여 측정하였다. pH에 따른 H&E염색의 염색성을 관찰하기 위하여 Harris hematoxylin과 Eosin 염료의 pH를 각각 8군(pH1.5~8.5)으로 나누어 염색을 실시하고, 광학현미경을 이용하여 염색성을 비교하였다. 결과: Harris hematoxylin의 경우 pH1.5, pH4.5에서 염색성이 저하되었고, pH2.5와 pH3.5에서 적정한 염색성을 보였으며, pH5.5~pH8.5에서 염색이 되지 않았다. Eosin의 경우 pH1.5, pH2.5, pH6.5에서 염색성이 저하되었고, pH3.5, pH4.5, pH5.5에서 적정한 염색성을 보였으며. pH7.5, pH8.5에서는 염색이 되지 않았다. 고찰: H&E염색은 pH의 변화에 따라 핵과 세포질의 염색성에 많은 차이를 보인다. 따라서 H&E염색의 염색성은 pH 변화에 영향을 받으므로 pH의 유지가 요구되며, 일정한 염색성을 가진 조직표본을 얻기 위해서는 검사실 실정에 맞는 지속적인 염료의 pH 관리가 필요하다고 사료된다.