Variation of radio-sensitivity of HepG2 cells by short interferencing RNA blockage of STAT3 gene
姚雨石, 潘真, 郁成雨, 唐古生, 秦阳华, 祝宝让
Abstract
姚雨石, 潘真, 郁成雨, 唐古生, 秦阳华, 祝宝让
Abstract
目的 研究瞬时转染的siRNA抑制STAT3基因表达对人肝癌HepG2细胞辐射敏感性的影响.方法 以人肝癌HepG2细胞作为研究对象,脂质体包裹化学合成的siRNA进行转染.采用实时RT-PCR和Western blotting法分别从mRNA水平和蛋白水平检测STAT3基因的表达及编码蛋白磷酸化活化的改变,用CCK-8法和Hoechst 33258 DNA染色法检测辐射敏感性的变化.结果 STAT3特异性的siRNA转染后HepG2细胞中STAT3基因mRNA拷贝数、STAT3蛋白表达和磷酸化水平均明显降低.mRNA水平的抑制效率可达70%.siRNA转染联合60Coγ射线照射后HepG2细胞增殖活力显著低于对照组(P<0.05).结论 针对人STAT3基因的siRNA能够抑制HepG2细胞STAT3基因的表达,降低STAT3蛋白活化水平,进而产生辐射增敏作用。
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目的 研究瞬时转染的siRNA抑制STAT3基因表达对人肝癌HepG2细胞辐射敏感性的影响.方法 以人肝癌HepG2细胞作为研究对象,脂质体包裹化学合成的siRNA进行转染.采用实时RT-PCR和Western blotting法分别从mRNA水平和蛋白水平检测STAT3基因的表达及编码蛋白磷酸化活化的改变,用CCK-8法和Hoechst 33258 DNA染色法检测辐射敏感性的变化.结果 STAT3特异性的siRNA转染后HepG2细胞中STAT3基因mRNA拷贝数、STAT3蛋白表达和磷酸化水平均明显降低.mRNA水平的抑制效率可达70%.siRNA转染联合60Coγ射线照射后HepG2细胞增殖活力显著低于对照组(P<0.05).结论 针对人STAT3基因的siRNA能够抑制HepG2细胞STAT3基因的表达,降低STAT3蛋白活化水平,进而产生辐射增敏作用。
Key concepts: Variation (astronomy), Sensitivity (control systems), Gene, Molecular biology, Chemistry, Biology, Genetics, Physics