Down-regulation of thevascular endothelial growth factor (VEGF) by a small interfering RNA targeting VEGF in thenasopharyngeal carcinoma cell line (CNE-2Z)
罗洁, 夏晓波, 熊思奇, 宋伟涛
Abstract
罗洁, 夏晓波, 熊思奇, 宋伟涛
Abstract
目的 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的特异性小片段干扰RNA(siRNA)对低分化鼻咽癌细胞(nasopharyngealcarcinoma cell line,CNE-2Z)VEGF表达的抑制作用,为视网膜新生血管的治疗提供新的途径.方法体外培养人CNE-2Z,并分成正常氧状态培养组(20%)和低氧(5%)培养组.采用脂质体(LF000)将VEGFsiRNA转染两组细胞,并采用免疫细胞化学和ELISA法检测鼻咽癌细胞在正常氧状态和低氧状态下VEGF蛋白质表达的差异.结果正常氧状态下培养的CNE-2Z细胞有VEGF165及VEGF121蛋白质的表达,主要见于细胞浆中(棕色颗粒),低氧状态下VEGF的表达增多.ELISA结果显示,正常氧状态下未转染组、转染空载体组、转染VEGFsiRNA组CNE-2Z细胞培养上清液中VEGF165的含量分别为:419.72pg/ml、410.61pg/ml、320.76pg/ml;低氧状态下VEGF165的含量分别为:805.61 pg/ml、798.81 Pg/ml、496.56pg/ml,转染VEGFsiRNA组VEGF的表达下调.结论 VEGF siRNA有效地、特异地抑制CNE-2Z细胞VEGF蛋白质的表达,有望成为防治视网膜血管新生性病变的一种有效方法。
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目的 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的特异性小片段干扰RNA(siRNA)对低分化鼻咽癌细胞(nasopharyngealcarcinoma cell line,CNE-2Z)VEGF表达的抑制作用,为视网膜新生血管的治疗提供新的途径.方法体外培养人CNE-2Z,并分成正常氧状态培养组(20%)和低氧(5%)培养组.采用脂质体(LF000)将VEGFsiRNA转染两组细胞,并采用免疫细胞化学和ELISA法检测鼻咽癌细胞在正常氧状态和低氧状态下VEGF蛋白质表达的差异.结果正常氧状态下培养的CNE-2Z细胞有VEGF165及VEGF121蛋白质的表达,主要见于细胞浆中(棕色颗粒),低氧状态下VEGF的表达增多.ELISA结果显示,正常氧状态下未转染组、转染空载体组、转染VEGFsiRNA组CNE-2Z细胞培养上清液中VEGF165的含量分别为:419.72pg/ml、410.61pg/ml、320.76pg/ml;低氧状态下VEGF165的含量分别为:805.61 pg/ml、798.81 Pg/ml、496.56pg/ml,转染VEGFsiRNA组VEGF的表达下调.结论 VEGF siRNA有效地、特异地抑制CNE-2Z细胞VEGF蛋白质的表达,有望成为防治视网膜血管新生性病变的一种有效方法。
Key concepts: VEGF receptors, Vascular endothelial growth factor, Small interfering RNA, Cancer research, Line (geometry), Cell culture, Oncology, Chemistry