2003•中华放射医学与防护杂志Requires access

Experimental studies on the activation of NF-κB and its signal pathway induced by low dose radiation

金顺子, 何淑杰, 刘树铮

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Abstract

目的研究低剂量电离辐射对转录因子NF-κB DNA结合活性的影响,探讨NF-κB结合活性信号传导通路的机理.方法采用凝胶电泳移动变化分析及免疫组织化学的方法检测了X射线照射后EL-4细胞NF-κB DNA结合活性的时程变化及p65核转位、I κBα水平的变化,同时用脂质体介导的瞬时转染法将空质粒和NF-κB-荧光素酶表达质粒转染到NIH3T3细胞内,并用PKC信号通路阻断剂Calphostin C处理,检测受照后其荧光素酶的表达变化.结果0.075 Gy X射线照射可诱导NF-κB、p50/p65和p50/p50活性增强,而前者活性增强更明显.这种转录激活能力的增强,涉及到辐射诱导的p65核转位和IκBα水平的变化,表现为受照后p65亚基核阳性率明显升高,而IκBα水平的变化正相反,在照后4 h分别达到峰值和低谷.而且PCK信号通路阻断剂Calphostin C可降低0.075Gy照射对NF-κB的活化效应.结论低水平照射诱导NF-κB的迅速活化,而且可能通过PKC通路,进而调节细胞因子等特异基因的表达,促使免疫功能增强,这可能是低剂量辐射兴奋效应的机理之一.

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目的研究低剂量电离辐射对转录因子NF-κB DNA结合活性的影响,探讨NF-κB结合活性信号传导通路的机理.方法采用凝胶电泳移动变化分析及免疫组织化学的方法检测了X射线照射后EL-4细胞NF-κB DNA结合活性的时程变化及p65核转位、I κBα水平的变化,同时用脂质体介导的瞬时转染法将空质粒和NF-κB-荧光素酶表达质粒转染到NIH3T3细胞内,并用PKC信号通路阻断剂Calphostin C处理,检测受照后其荧光素酶的表达变化.结果0.075 Gy X射线照射可诱导NF-κB、p50/p65和p50/p50活性增强,而前者活性增强更明显.这种转录激活能力的增强,涉及到辐射诱导的p65核转位和IκBα水平的变化,表现为受照后p65亚基核阳性率明显升高,而IκBα水平的变化正相反,在照后4 h分别达到峰值和低谷.而且PCK信号通路阻断剂Calphostin C可降低0.075Gy照射对NF-κB的活化效应.结论低水平照射诱导NF-κB的迅速活化,而且可能通过PKC通路,进而调节细胞因子等特异基因的表达,促使免疫功能增强,这可能是低剂量辐射兴奋效应的机理之一.

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目的研究低剂量电离辐射对转录因子NF-κB DNA结合活性的影响,探讨NF-κB结合活性信号传导通路的机理.方法采用凝胶电泳移动变化分析及免疫组织化学的方法检测了X射线照射后EL-4细胞NF-κB DNA结合活性的时程变化及p65核转位、I κBα水平的变化,同时用脂质体介导的瞬时转染法将空质粒和NF-κB-荧光素酶表达质粒转染到NIH3T3细胞内,并用PKC信号通路阻断剂Calphostin C处理,检测受照后其荧光素酶的表达变化.结果0.075 Gy X射线照射可诱导NF-κB、p50/p65和p50/p50活性增强,而前者活性增强更明显.这种转录激活能力的增强,涉及到辐射诱导的p65核转位和IκBα水平的变化,表现为受照后p65亚基核阳性率明显升高,而IκBα水平的变化正相反,在照后4 h分别达到峰值和低谷.而且PCK信号通路阻断剂Calphostin C可降低0.075Gy照射对NF-κB的活化效应.结论低水平照射诱导NF-κB的迅速活化,而且可能通过PKC通路,进而调节细胞因子等特异基因的表达,促使免疫功能增强,这可能是低剂量辐射兴奋效应的机理之一.

Key concepts: NF-κB, Low Dose Radiation, Radiation, Ionizing radiation, Chemistry, Signal transduction, Irradiation, Medicine

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