2008•中国医师杂志Requires access

Curcumin inhibit the expression of VEGF and HIF-1α protein in human hepatocellular carcinoma BEL-7402 cells by PI3K/AKT/FRAP signal transduction pathway

孙军, 李岩, 王贺玲

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Abstract

目的 探讨MAPK和PI3K信号传导通路在姜黄素调节VEGF和HIF-1α表达中的作用.方法 分别加入LY29400225 μmol/L、50 μmol/L,U0126 10 μmol/L、20 μmol/L,rapamycin 5 ng/ml、10 ng/ml处理人肝癌细胞BEL-7402,30 min后加入姜黄素10 μmol/L,对照组单独加入0、10 μmol/L姜黄素,缺氧环境中培养6 h后,行RT-PCR和Western Blot检测VEGF蛋白、mRNA和HIF-1α蛋白表达;分别加入不同浓度的的姜黄素以及LY294002 25 μmol/L处理人肝癌细胞BEL-7402,缺氧环境中培养6 h后,行Western Blot检测磷酸化AKT和总AKT蛋白表达.结果 姜黄素10 μmol/L+LY294002 25 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+LY294002 50 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+rapamycin 5 ng/ml组、姜黄素10 μmol/L+rapamycin 10 ng/ml组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10 μmol/L组相比降低,差异有统计学意义(P<0.01);而姜黄素10 μmol/L+U0126 10 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+U0126 20 μmol/L组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10 μmol/L组相比差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度的姜黄素、LY294002 25 μmol/L处理的人肝癌细胞BEL-7402缺氧6 h后磷酸化AKT蛋白表达逐渐降低,LY294002 25 μmol/L可以基本阻断磷酸化AKT蛋白的表达,而对总AKT蛋白表达无明显变化.结论 姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α蛋白和VEGF的表达通过PI3K/AKT/FRAP信号传导通路。

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目的 探讨MAPK和PI3K信号传导通路在姜黄素调节VEGF和HIF-1α表达中的作用.方法 分别加入LY29400225 μmol/L、50 μmol/L,U0126 10 μmol/L、20 μmol/L,rapamycin 5 ng/ml、10 ng/ml处理人肝癌细胞BEL-7402,30 min后加入姜黄素10 μmol/L,对照组单独加入0、10 μmol/L姜黄素,缺氧环境中培养6 h后,行RT-PCR和Western Blot检测VEGF蛋白、mRNA和HIF-1α蛋白表达;分别加入不同浓度的的姜黄素以及LY294002 25 μmol/L处理人肝癌细胞BEL-7402,缺氧环境中培养6 h后,行Western Blot检测磷酸化AKT和总AKT蛋白表达.结果 姜黄素10 μmol/L+LY294002 25 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+LY294002 50 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+rapamycin 5 ng/ml组、姜黄素10 μmol/L+rapamycin 10 ng/ml组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10 μmol/L组相比降低,差异有统计学意义(P<0.01);而姜黄素10 μmol/L+U0126 10 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+U0126 20 μmol/L组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10 μmol/L组相比差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度的姜黄素、LY294002 25 μmol/L处理的人肝癌细胞BEL-7402缺氧6 h后磷酸化AKT蛋白表达逐渐降低,LY294002 25 μmol/L可以基本阻断磷酸化AKT蛋白的表达,而对总AKT蛋白表达无明显变化.结论 姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α蛋白和VEGF的表达通过PI3K/AKT/FRAP信号传导通路。

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目的 探讨MAPK和PI3K信号传导通路在姜黄素调节VEGF和HIF-1α表达中的作用.方法 分别加入LY29400225 μmol/L、50 μmol/L,U0126 10 μmol/L、20 μmol/L,rapamycin 5 ng/ml、10 ng/ml处理人肝癌细胞BEL-7402,30 min后加入姜黄素10 μmol/L,对照组单独加入0、10 μmol/L姜黄素,缺氧环境中培养6 h后,行RT-PCR和Western Blot检测VEGF蛋白、mRNA和HIF-1α蛋白表达;分别加入不同浓度的的姜黄素以及LY294002 25 μmol/L处理人肝癌细胞BEL-7402,缺氧环境中培养6 h后,行Western Blot检测磷酸化AKT和总AKT蛋白表达.结果 姜黄素10 μmol/L+LY294002 25 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+LY294002 50 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+rapamycin 5 ng/ml组、姜黄素10 μmol/L+rapamycin 10 ng/ml组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10 μmol/L组相比降低,差异有统计学意义(P<0.01);而姜黄素10 μmol/L+U0126 10 μmol/L组、姜黄素10 μmol/L+U0126 20 μmol/L组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10 μmol/L组相比差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度的姜黄素、LY294002 25 μmol/L处理的人肝癌细胞BEL-7402缺氧6 h后磷酸化AKT蛋白表达逐渐降低,LY294002 25 μmol/L可以基本阻断磷酸化AKT蛋白的表达,而对总AKT蛋白表达无明显变化.结论 姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α蛋白和VEGF的表达通过PI3K/AKT/FRAP信号传导通路。

Key concepts: Protein kinase B, LY294002, Western blot, PI3K/AKT/mTOR pathway, Molecular biology, Chemistry, Mole, MAPK/ERK pathway

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