A Study on Cyclic Nucleotides (III)
Terukazu TAKANO, Yoshinori Watanabe, Kyoko TAKENO, Kinya Moriya, Tomoe Kuroiwa, Yukio Kishi, Michio Tanaka, Michiyoshi Yajima, Fujío Numano
Abstract
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Terukazu TAKANO, Yoshinori Watanabe, Kyoko TAKENO, Kinya Moriya, Tomoe Kuroiwa, Yukio Kishi, Michio Tanaka, Michiyoshi Yajima, Fujío Numano
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Cyclic nucleotide 代謝は, 細胞代謝, 機能を司さどる重要な代謝系として注目されつつある. 1963年 Ashman により生体に存在する第2の cyclic nucleotide として guanosine 3′,5′-cyclic monophosphate (cGMP) が発見されて以来cAMPとならんでその生体における生理的意義, 作用機序, 病態生理に伴う変化が注目され研究されて来ている. しかしcGMPはcAMPの場合と異なりその含有量は, cAMPに比し1/10~1/100であるため正確な測定が困難でその生体の解明は未だ緒についたばかりである. 我々は, 動脈硬化症の成因, 予防, 治療の観点より血管壁 cyclic nucleotide 代謝を追求すべく Lowry の微量酵素定量法を応用しcAMPおよび cAMP phosphodiesterase 活性の測定法を工夫し, 報告した. 今回, 更に微量のcGMP測定を血管壁で行なうべく Lowry の微量測定法を基盤として, (1) 抗原抗体反応を効率よくさせるべく succinyl 化を行なって測定, 感度を一般に行なわれている測定法の約100倍上げ, (2) ついで alumina column chromatography にてcAMPおよびcGMPを分離, (3) radioimmunoassay を応用して測定することに成功した. これにより組織量, 特に血管壁内膜40~100μg dry weight (d. w.) にてcGMPの測定が可能となった. 本法によって測定した成熟雄牛, 豚, 羊, 家兎3匹の大動脈壁中cGMP含有量は, 牛内膜250±50, 中膜173±3fmole/mg d. w. で, 豚ではそれぞれ126±8, 176±24, 羊280±20, 146±14, 家兎250±50, 173±50fmole/mg d. w. の結果を得, 牛, 羊, 家兎の内膜cGMP含有量は, いずれも中膜に比し有意の高い値が得られた (p<0.05). このことは内膜におけるcGMPの重要な役割を示唆しているものと思われた.
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Cyclic nucleotide 代謝は, 細胞代謝, 機能を司さどる重要な代謝系として注目されつつある. 1963年 Ashman により生体に存在する第2の cyclic nucleotide として guanosine 3′,5′-cyclic monophosphate (cGMP) が発見されて以来cAMPとならんでその生体における生理的意義, 作用機序, 病態生理に伴う変化が注目され研究されて来ている. しかしcGMPはcAMPの場合と異なりその含有量は, cAMPに比し1/10~1/100であるため正確な測定が困難でその生体の解明は未だ緒についたばかりである. 我々は, 動脈硬化症の成因, 予防, 治療の観点より血管壁 cyclic nucleotide 代謝を追求すべく Lowry の微量酵素定量法を応用しcAMPおよび cAMP phosphodiesterase 活性の測定法を工夫し, 報告した. 今回, 更に微量のcGMP測定を血管壁で行なうべく Lowry の微量測定法を基盤として, (1) 抗原抗体反応を効率よくさせるべく succinyl 化を行なって測定, 感度を一般に行なわれている測定法の約100倍上げ, (2) ついで alumina column chromatography にてcAMPおよびcGMPを分離, (3) radioimmunoassay を応用して測定することに成功した. これにより組織量, 特に血管壁内膜40~100μg dry weight (d. w.) にてcGMPの測定が可能となった. 本法によって測定した成熟雄牛, 豚, 羊, 家兎3匹の大動脈壁中cGMP含有量は, 牛内膜250±50, 中膜173±3fmole/mg d. w. で, 豚ではそれぞれ126±8, 176±24, 羊280±20, 146±14, 家兎250±50, 173±50fmole/mg d. w. の結果を得, 牛, 羊, 家兎の内膜cGMP含有量は, いずれも中膜に比し有意の高い値が得られた (p<0.05). このことは内膜におけるcGMPの重要な役割を示唆しているものと思われた.
Key concepts: Cyclic nucleotide, Nucleotide, PDE10A, Guanosine, Cyclic gmp, Phosphodiesterase, Cyclic guanosine monophosphate, Radioimmunoassay