بیان پپتید دارویی vessel dilator در باکتری اشریشیا کلی

هورمون 37 اسيد آمينه¬اي vessel dilator، متعلق به خانواده اي از هورمون¬هاي پپتيدي است که به صورت يک مولکول پيش ساز 126 اسيد آمينه¬اي proANP در قلب توليد مي گردد. قبلا، ديگر عضوهاي اين خانواده به ويژه هورمون پپتيدي BNP براي درمان بيماري نارسايي احتقاني قلب (يکي از بيماري¬هاي کشنده که شايع ترين علت بستري افراد بالا تر از 65 سال و پرهزينه ترين علت بستري در بيمارستان مي¬باشد ) تجويز مي¬شد که آثار جانبي بسياري را، روي انسان نشان داده است. مطالعات اخیر دانشمندان ثابت کرده استکه، هورمون پپتيدي vessel dilator داراي اثرات مفيد به مراتب بيشتری با پایداری بالاتردر طی زمان بوده و فاقد آثار جانبي BNP براي درمان اين بيماري مي باشد. از طرفی، نتايج مطالعات چند سال اخير به منظور بررسي تاثير اين هورمون پپتيدي در مهار توده هاي سرطاني در سرطان¬هاي سينه، تخمدان، لوزالمعده، سلول¬هاي سنگفرشي ريه، کليه و پروستات بسيار مهيج مي¬باشد. به نحوي که در بسياري از موارد، رشد سلول¬هاي سرطاني کاملا متوقف میشود. هم اکنون، مطالعات گسترده اي براي درک مکانيسم اثر اين هورمون براي مهار سلول¬هاي سرطاني در حال انجام است و به عنوان تحولی جدیددر درمان سرطان مطرح میشود. در حال حاضر يک شرکت آمريکايي در حال جمع آوري اعتبار براي آغاز آزمايشات باليني اين دارو روي بيماران مبتلا به سرطان مي¬باشد. با توجه به اهميت روز افزون دارويي پپتيد vessel dilator و با عنايت به اين مهم که هنوز هيچ گزارشي در منابع علمي مبني بر توليد تجاري و به ويژه توليد نوترکيب آن گزارش نشده است، اين پروژه با هدف توليد انبوه vessel dilator در باکتري E. coli تعريف مي¬گردد. لازم به ذکر است که سيستم بياني E. coli يکي از قوي ترين و به صرفه ترين سيستم ¬هاي بياني مي¬باشد که تا کنون شمار زيادي از پروتئين¬هاي دارويي مهم با استفاده از اين سيستم در دنيا توليد شده¬اند. در این پروژه، به منظور بيان نوترکيب مولکول پپتيدي vessel dilator ابتدا توالي DNA کد کننده 37 اسيدآمينه پپتید مربوطه با توجه به ساختار ثانويه mRNA ، بهينه سازي کدون¬ها و تعبیه جايگاه هاي برشي مناسب، طراحي و در مرحله بعد با استفاده از تکنيک¬هاي سنتز ژن ساخته ميشود. سپس قطعه ساخته شده در ناقل مناسب بياني، همسانه¬سازي شده و براي بيان پروتئين مورد نظر القاء مي¬گردد. در نهايت پروتين نوترکيب تولید شده با استفاده از سیستم کروماتوگرافی جذبی خالص¬سازي و صحت آن با استفاده از تکنيک¬هاي مناسب تائيد خواهد گشت. هورمون 37 اسيد آمينه¬اي vessel dilator، متعلق به خانواده اي از هورمون¬هاي پپتيدي است که به صورت يک مولکول پيش ساز 126 اسيد آمينه¬اي proANP در قلب توليد مي گردد. قبلا، ديگر عضوهاي اين خانواده به ويژه هورمون پپتيدي BNP براي درمان بيماري نارسايي احتقاني قلب (يکي از بيماري¬هاي کشنده که شايع ترين علت بستري افراد بالا تر از 65 سال و پرهزينه ترين علت بستري در بيمارستان مي¬باشد ) تجويز مي¬شد که آثار جانبي بسياري را، روي انسان نشان داده است. مطالعات اخیر دانشمندان ثابت کرده استکه، هورمون پپتيدي vessel dilator داراي اثرات مفيد به مراتب بيشتری با پایداری بالاتردر طی زمان بوده و فاقد آثار جانبي BNP براي درمان اين بيماري مي باشد. از طرفی، نتايج مطالعات چند سال اخير به منظور بررسي تاثير اين هورمون پپتيدي در مهار توده هاي سرطاني در سرطان¬هاي سينه، تخمدان، لوزالمعده، سلول¬هاي سنگفرشي ريه، کليه و پروستات بسيار مهيج مي¬باشد. به نحوي که در بسياري از موارد، رشد سلول¬هاي سرطاني کاملا متوقف میشود. هم اکنون، مطالعات گسترده اي براي درک مکانيسم اثر اين هورمون براي مهار سلول¬هاي سرطاني در حال انجام است و به عنوان تحولی جدیددر درمان سرطان مطرح میشود. در حال حاضر يک شرکت آمريکايي در حال جمع آوري اعتبار براي آغاز آزمايشات باليني اين دارو روي بيماران مبتلا به سرطان مي¬باشد. با توجه به اهميت روز افزون دارويي پپتيد vessel dilator و با عنايت به اين مهم که هنوز هيچ گزارشي در منابع علمي مبني بر توليد تجاري و به ويژه توليد نوترکيب آن گزارش نشده است، اين پروژه با هدف توليد انبوه vessel dilator در باکتري E. coli تعريف مي¬گردد. لازم به ذکر است که سيستم بياني E. coli يکي از قوي ترين و به صرفه ترين سيستم ¬هاي بياني مي¬باشد که تا کنون شمار زيادي از پروتئين¬هاي دارويي مهم با استفاده از اين سيستم در دنيا توليد شده¬اند. در این پروژه، به منظور بيان نوترکيب مولکول پپتيدي vessel dilator ابتدا توالي DNA کد کننده 37 اسيدآمينه پپتید مربوطه با توجه به ساختار ثانويه mRNA ، بهينه سازي کدون¬ها و تعبیه جايگاه هاي برشي مناسب، طراحي و در مرحله بعد با استفاده از تکنيک¬هاي سنتز ژن ساخته ميشود. سپس قطعه ساخته شده در ناقل مناسب بياني، همسانه¬سازي شده و براي بيان پروتئين مورد نظر القاء مي¬گردد. در نهايت پروتين نوترکيب تولید شده با استفاده از سیستم کروماتوگرافی جذبی خالص¬سازي و صحت آن با استفاده از تکنيک¬هاي مناسب تائيد خواهد گشت.